幹細胞培養
幹細胞培養
R:STEM ( EM1-500 ) 間質幹細胞無血清 AOF 培養基
日本第一個取得以 ISO 20399 為適用規格之 FIRM 標誌認證 ( 認證編號 : CAM - 0001 )
取得日本 PMDA 發行的再生醫療等產品材料合格確認書 ( 產品型號 : EM1 - 500 )
不含人類和動物來源成分 - 降低由血清等引起的病毒感染等風險
不含 EVs - 降低 EVs 等引起的細胞性質變化
不含抗生素 - 降低影響细胞增殖等细胞毒性的風險
可化學定義的成分,降低批次間差異 - 減輕由於批次檢測帶來的工作負擔
Ready - to - use,可直接解凍後使用 - 簡化補充劑的添加等前處理程序
培養基中 EVs 含量測定:
R:STEM ( EM1-500 ) 不含 EVs
R:STEM ( EM1-500 )與市售 Xeno-free 培養基 EVs 含量使用 CD9 / CD63 ELISA kit 測定。( Mann-WhitneyU test, *p<0.05 )
R:STEM ( EM1-500 ) 細胞培養穩定性:
R:STEM ( EM1-500 ) 批次差異小,細胞培養時的品質變化控制在最小範圍內
將脂肪來源的 hMSCs 使用 R:STEM ( EM1-500 ) 進行 3 個批次培養,從 Passage 2 到 Passage 4,並對 Passage 4 的細胞進行細胞群倍增數(populationdoubling level: PDL)和倍增時間(population doubling time: PDT)的計算。
脂肪來源 hMSCs 的細胞使用 R:STEM ( EM1-500 )進行培養測試結果
脂肪來源 hMSCs 的細胞擴增能力實驗:
R:STEM ( EM1-500 ) 能夠促進脂肪來源 hMSCs 的細胞擴增
使用 R:STEM、市售 AOF 培養基及市售 Xeno-free 培養基,對脂肪來源的 hMSCs 進行繼代培養,從 Passage 2 培養 Passage 4 並對細胞進行群倍增數(population doubling level: PDL)和倍增時間(population doubling time: PDT)的計算與細胞狀態觀察。 (Kruskal-Wallis test, n.s.)
脂肪來源 hMSCs 的人類 MSC 表面標記分析:
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 培養的脂肪來源 hMSCs 符合國際細胞治療學會的人類 MSC 標準
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 培養脂肪來源 hMSCs,從 Passage 2 培養到 Passage 4,利用 fow cytometry 測定 Passage 4 細胞中國際細胞治療學會認定的 MSC 相關表面標記。( 結果顯示 positive marker CD73, CD90, CD105: >95%, negative marker CD11b, CD34, CD45, HLADR: <2% )
脂肪來源 hMSCs 的分化能力測定:
使用R:STEM ( EM1-500 )培養的脂肪來源 hMSCs 具有三向分化能力。
使用 R:STEM (EM1-500) 培養脂肪來源 hMSCs,從 Passage 2培養到 Passage 4,誘導 Passage 4 細胞進行脂肪、骨、軟骨的細胞分化。分化程度分別使用 Oil Red O 染色, Alizarin Red 染色, Alcian blue 染色。
脂肪來源 hMSCs 的染色體核型分析:
R:STEM ( EM1-500 ) 不會影響脂肪來源 hMSCs 的染色體
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 培養脂肪來源 hMSCs,從 Passage 2 培養到 Passage 4,對 Passage 4 的細胞進行 G-band 染色後,隨機對 8 個細胞進行核型分析。
脂肪來源 hMSCs 分泌 EVs 能力評估:
R:STEM ( EM1-500 ) 能促進脂肪來源 hMSCs 分泌 EVs
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 或市售 AOF 培養基培養臍帶來源 hMSCs,從 Passage 2 培養到 Passage 4,使用 CD9 / CD63 ELISA kit 及ExoCounter 測定 Passage 4 細胞上清液中 EVs 含量。 ( Mann-WhintneyU test, *PV<0.05 )
脂肪來源 hMSCs 分泌 HGF能力評估:
R:STEM ( EM1-500 ) 能促進脂肪來源 hMSCs 分泌 HGF
使用R:STEM(EM1-500)、市售AOF培養基及市售Xeno-free培養基培養脂肪來源hMSCs,從 Passage2 培養到 Passage 4,利用 HGF ELISA kit 測定 Passage 4 細胞上清液中 HGF 含量。 ( Steel's test, *p<0.05 )
臍帶來源 hMSCs 的細胞使用R:STEM ( EM1-500 )進行培養測試結果
臍帶來源 hMSCs 的細胞擴增能力實驗:
R:STEM ( EM1-500 ) 能夠促進臍帶來源 hMSCs 的細胞擴增
使用 R:STEM、市售 AOF 培養基及市售 Xeno-free 培養基,對臍帶來源的 hMSCs 進行繼代培養,從Passage2 培養到 Passage4 並對細胞進行群倍增數(population doubling level: PDL)的計算與細胞狀態觀察。
( Kruskal-Wallis test, n.s. )
臍帶來源 hMSCs 的人類 MSC 表面標記分析:
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 培養的臍帶來源 hMSCs 符合國際細胞治療學會的人類 MSC 標準
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 培養臍帶來源 hMSCs,從 Passage 2 培養到 Passage 4,利用 flow cytometry 測定 Passage 4 細胞中國際細胞治療學會認定的 MSC 相關表面標記。( 結果顯示 positive marker CD73, CD90, CD105: >95%, negative marker CD11b, CD34, CD45, HLADR: <2% )
臍帶來源 hMSCs 分泌 EVs 能力評估:
R:STEM ( EM1-500 ) 能促進臍帶來源 hMSCs 分泌 EVs
使用 R:STEM ( EM1-500 ) 或市售 AOF 培養基培養臍帶來源 hMSCs,從 Passage 2 培養到 Passage 4,使用 CD9 / CD63 ELISA kit 及 ExoCounter 測定 Passage 4 細胞上清液中 EVs 含量。 ( Mann-WhitneyU test, *p<0.05)
臍帶來源 hMSCs 分泌 HGF能力評估:
R:STEM ( EM1-500 ) 能促進臍帶來源 hMSCs 分泌 HGF
使用 R:STEM ( EM1-500 )、市售 AOF 培養基及市售 Xeno-free 培養基培養臍帶來源 hMSCs,從 Passage2 培養到 Passage 4,利用 HGF ELISA kit 測定 Passage 4 細胞上清液中 HGF 含量。 ( Steel's test, p<0.05 )
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